Odgovor:
- restrikcijski enzim je glavni alat rekombinantnog dna technolog
Obrazloženje:
- svi restrikcijski enzimi pregledavaju DNA molekulu u seriji specifične sekvencije prepoznavanja. nakon što dobije određenu sekvencu prepoznavanja, veže se na mjesto i reže svaku od dvije niti dvostruke zavojnice u određenim točkama hidrolizom fosfodiesterskih veza.
OGRANIČENI ENZIMI ZOVUČU SE KAO MOLEKULARNE NOŽNICE
Zašto su restrikcijski enzimi važni za DNA otisak?
Restrikcijski enzimi će izrezati DNA molekulu samo na određenom uzorku baza. Budući da svi organizmi (od nezavisnih zigota) posjeduju jedinstvenu DNK, restrikcijski enzimi će rezati DNA na različitim položajima i različitim frekvencijama. To rezultira različitim brojem "komadića" različitih duljina / veličina. Polimorfizmi dužine restrikcijskog fragmenta (RFLP) je analiza fragmenata proizvedenih iz danog restrikcijskog enzima - fragmenti su djelomično nabijeni i odgovorit će na električna polja. Enzim je važan jer "proizvedeni otisak prsta" ovisi o komadićima razrezane DNA različitih veličina koji uzima
Zašto se restrikcijski enzimi čuvaju u 50% -tnoj otopini glicerola?
Kako bi ih održali netaknutim ... Enzimi za ograničenje se koriste u vrlo malim količinama, ali se obično kupuju u nešto većim serijama. Ako ništa drugo, obično radite različite testove s istom skupinom. Kupljena serija stoga se mora čuvati duže vrijeme. Većina enzima je savršeno sretna u svom puferu na 4 stupnja Celzijusa neko vrijeme, ali će se na kraju degradirati. 24 sata je obično prihvaćeno ograničenje. Za duže skladištenje serija mora biti zamrznuta. -20C je standard i zadržat će ga nekoliko mjeseci. Za još dulja razdoblja (npr. Jedna ili više godina) -70C je norma. Potrebno ga je brzo zamrznuti i to u malim spremni
Zašto je važnije da restrikcijski enzimi prepoznaju palindromne sekvence?
Unatoč tome što je endonukleaza, tj. Enzim za varenje nukleinske kiseline, restrikcijska endonukleaza ne nasumično uništava DNA molekulu. Enzimi su rezali samo palindromske sekvence da bi formirali manje fragmente DNA. Za rezanje kružne molekule DNA prokariotskog podrijetla koriste se restrikcijski enzimi. Ovaj tip endonukleaze često proizvodi ljepljive krajeve koji pomažu u stvaranju rekombinantne DNA, tj. Fragment fragmenta stranca (koji sadrži željeni gen) može biti umetnut u rez. Tehnologija rekombinantne DNA otvorila je novi horizont u biološkoj znanosti.